बॅनर

न्यूक्लिक ॲसिड निष्कर्षण तंत्रज्ञानाचा परिचय

Nयुक्लिक ऍसिडiपरिचय

न्यूक्लिक ॲसिड डीऑक्सीरिबोन्यूक्लिक ॲसिड (DNA) आणि रिबोन्यूक्लिक ॲसिड (RNA) मध्ये विभागले गेले आहे, त्यापैकी RNA ची विभागणी ribosomal RNA(rRNA), मेसेंजर RNA(mRNA) आणि ट्रान्सफर RNA(tRNA) मध्ये त्याच्या वेगवेगळ्या कार्यांनुसार केली जाते.डीएनए मुख्यत्वे न्यूक्लियस, माइटोकॉन्ड्रिया आणि क्लोरोफॉर्ममध्ये केंद्रित आहे, तर आरएनए मुख्यतः साइटोप्लाझममध्ये वितरीत केले जाते.जनुक अभिव्यक्तीचा भौतिक आधार म्हणून, आण्विक जीवशास्त्र संशोधन आणि नैदानिक ​​आण्विक निदानामध्ये न्यूक्लिक ॲसिड निष्कर्षण अत्यंत महत्त्वाची भूमिका बजावते.न्यूक्लिक ॲसिड निष्कर्षणाची एकाग्रता आणि शुद्धता थेट त्यानंतरच्या पीसीआर, सिक्वेन्सिंग, वेक्टर बांधकाम, एंजाइम पचन आणि इतर प्रयोगांवर परिणाम करेल.

 न्यूक्लिक ॲसिड काढण्याची आणि शुद्धीकरणाची पद्धत 

① फिनॉल/क्लोरोफॉर्म काढण्याची पद्धत

फिनॉल/क्लोरोफॉर्म एक्स्ट्रॅक्शन ही DNA काढण्याची शास्त्रीय पद्धत आहे, जी नमुन्यांवर उपचार करण्यासाठी प्रामुख्याने दोन भिन्न सेंद्रिय सॉल्व्हेंट्स वापरते, पाण्याच्या टप्प्यात DNA आधारित न्यूक्लिक ॲसिड विरघळते, सेंद्रिय टप्प्यात लिपिड्स आणि दोन टप्प्यांमधील प्रथिने.या पद्धतीमध्ये कमी किमतीचे, उच्च शुद्धता आणि चांगले परिणामाचे फायदे आहेत.तोटे क्लिष्ट ऑपरेशन आणि दीर्घ काळ आहेत.

② ट्रायझोल पद्धत

ट्रायझोल पद्धत आरएनए काढण्यासाठी शास्त्रीय पद्धत आहे.क्लोरोफॉर्मसह सेंट्रीफ्यूगेशननंतर ट्रायझोल पद्धत जलीय टप्प्यात आणि सेंद्रिय टप्प्यात विभागली जाते, ज्यामध्ये आरएनए जलीय टप्प्यात विरघळली जाते, जलीय अवस्था नवीन EP ट्यूबमध्ये हस्तांतरित केली जाते, आयसोप्रोपॅनॉल जोडल्यानंतर वर्षाव प्राप्त होतो आणि नंतर इथेनॉल शुद्धीकरण होते.ही पद्धत प्राण्यांच्या ऊती, पेशी आणि बॅक्टेरियापासून आरएनए काढण्यासाठी योग्य आहे.

③ केंद्रापसारक स्तंभ शुद्धीकरण पद्धत

सेंट्रीफ्यूज स्तंभ शुद्धीकरण पद्धत विशेषत: विशेष सिलिकॉन मॅट्रिक्स शोषण सामग्रीद्वारे डीएनए शोषू शकते, तर आरएनए आणि प्रथिने सहजतेने जाऊ शकतात आणि नंतर न्यूक्लिक ॲसिड एकत्र करण्यासाठी उच्च मीठ कमी PH, न्यूक्लिक ॲसिड वेगळे आणि शुद्ध करण्यासाठी कमी मीठ उच्च PH व्हॅल्यू इल्यूशन वापरतात.फायदे उच्च शुद्धीकरण एकाग्रता, उच्च स्थिरता, सेंद्रीय सॉल्व्हेंटची आवश्यकता नाही आणि कमी किंमत आहे.गैरसोय म्हणजे ते चरण-दर-चरण, अधिक ऑपरेशन चरणे सेंट्रीफ्यूज करणे आवश्यक आहे.

fiytjt (1)

④ चुंबकीय मणी पद्धत

चुंबकीय मणी पद्धती म्हणजे सेल टिश्यू नमुना लाइसेटद्वारे विभाजित करणे, नमुन्यातील न्यूक्लिक ॲसिड सोडणे आणि नंतर न्यूक्लिक ॲसिडचे रेणू चुंबकीय मण्यांच्या पृष्ठभागावर विशेषतः शोषले जातात, तर प्रथिने आणि शर्करा यांसारख्या अशुद्धता त्यामध्ये सोडल्या जातात. द्रव.सेल टिश्यू स्प्लिटिंग, न्यूक्लिक ॲसिडसह चुंबकीय मणी बांधणे, न्यूक्लिक ॲसिड वॉशिंग, न्यूक्लिक ॲसिड उत्सर्जन इत्यादी पायऱ्यांद्वारे शुद्ध न्यूक्लिक ॲसिड मिळते.स्टेप सेंट्रीफ्यूगेशनची गरज नसताना साधे ऑपरेशन आणि कमी वेळ वापरणे हे फायदे आहेत.यात कमी तांत्रिक आवश्यकता आहेत आणि ते स्वयंचलित आणि मोठ्या प्रमाणावर ऑपरेशन करू शकतात.चुंबकीय मणी आणि न्यूक्लिक ॲसिडच्या विशिष्ट संयोजनामुळे काढलेले न्यूक्लिक ॲसिड उच्च एकाग्रता आणि शुद्धतेसह बनते.गैरसोय म्हणजे सध्याचे बाजारभाव तुलनेने महाग आहेत.

fiytjt (2)

⑤ इतर पद्धती

वरील चार पद्धतींव्यतिरिक्त, उकळत्या क्रॅकिंग, एकाग्र मीठ पद्धत, ॲनिओनिक डिटर्जंट पद्धत, अल्ट्रासोनिक पद्धत आणि एन्झाईमॅटिक पद्धत इ.

 न्यूक्लिक ॲसिड काढण्याचा प्रकार

फोरजीनकडे जगातील आघाडीचे डायरेक्ट पीसीआर प्लॅटफॉर्म आहे, डबल-कॉलम आरएनए आयसोलेशन प्लॅटफॉर्म (केवळ-डीएनए + आरएनए फक्त).मुख्य उत्पादनांमध्ये डीएनए/आरएनए आयसोलेशन किट, पीसीआर आणि डायरेक्ट पीसीआर अभिकर्मक आण्विक लॅब अभिकर्मक मालिका समाविष्ट आहेत.

① एकूण आरएनए निष्कर्षण

एकूण आरएनए निष्कर्षण नमुन्यांमध्ये रक्त, पेशी, प्राण्यांच्या ऊती, वनस्पती, विषाणू इत्यादींचा समावेश होतो. एकूण आरएनए एक्सट्रॅक्शनद्वारे उच्च शुद्धता आणि उच्च एकाग्रता एकूण आरएनए मिळवता येते, जी आरटी-पीसीआर, चिप विश्लेषण, इन विट्रो ट्रान्सलेशनमध्ये वापरली जाऊ शकते. आण्विक क्लोनिंग, डॉट ब्लॉट आणि इतर प्रयोग.

फोरजीन संबंधितआरएनए अलगाव किट

fiytjt (3)

प्राणी एकूण आरएनए अलगाव किट--विविध प्राण्यांच्या ऊतींमधून जलद आणि कार्यक्षमतेने उच्च-शुद्धता आणि उच्च-गुणवत्तेचे एकूण आरएनए काढा.

fiytjt (4)

सेल टोटल आरएनए अलगाव किट--उच्च शुद्ध आणि उच्च दर्जाचे एकूण आरएनए विविध संवर्धित पेशींमधून 11 मिनिटांत मिळू शकते.

fiytjt (5)

प्लांट टोटल आरएनए आयसोलेशन किट--कमी पॉलिसेकेराइड आणि पॉलिफेनॉल सामग्री असलेल्या वनस्पतींच्या नमुन्यांमधून द्रुतपणे उच्च-गुणवत्तेचे एकूण आरएनए काढा.

fiytjt (6)

व्हायरल आरएनए अलगाव किट--प्लाझ्मा, सीरम, सेल-फ्री बॉडी फ्लुइड्स आणि सेल कल्चर सुपरनॅटंट्स यांसारख्या नमुन्यांमधून व्हायरल आरएनए वेगाने वेगळे आणि शुद्ध करा.

② जीनोमिक डीएनए निष्कर्षण

जीनोमिक डीएनए निष्कर्षण नमुन्यांमध्ये माती, विष्ठा, रक्त, पेशी, प्राण्यांच्या ऊती, वनस्पती, विषाणू इत्यादींचा समावेश होतो. जीनोमिक डीएनए निष्कर्षण एन्झाईम पचन, डीएनए लायब्ररी बांधकाम, पीसीआर, अँटीबॉडी तयार करणे, वेस्टर्न ब्लॉट हायब्रिडायझेशन विश्लेषण, जीन चिप, उच्च -थ्रूपुट अनुक्रम आणि इतर प्रयोग.

फोरजीन संबंधितडीएनए अलगाव किट

fiytjt (7)

ॲनिमल टिश्यू डीएनए आयसोलेशन किट--प्राण्यांच्या ऊती, पेशी इ. सारख्या अनेक स्त्रोतांकडून जीनोमिक डीएनएचे जलद निष्कर्षण आणि शुद्धीकरण.

fiytjt (8)

रक्त डीएनए मिडी किट (1-5 मिली)उच्च-गुणवत्तेचा जीनोमिक डीएनए अँटीकॉग्युलेटेड रक्त (1-5 मिली) पासून द्रुतपणे शुद्ध करा.

fiytjt (9)

बक्कल स्वॅब/एफटीए कार्ड डीएनए आयसोलेशन किट--बकल स्वॅब/एफटीए कार्डच्या नमुन्यांमधून उच्च-गुणवत्तेचे जीनोमिक डीएनए द्रुतपणे शुद्ध करा.

fiytjt (10)

प्लांट डीएनए आयसोलेशन किट--त्वरीत शुद्ध करा आणि वनस्पतींच्या नमुन्यांमधून उच्च-गुणवत्तेचा जीनोमिक डीएनए मिळवा (पॉलीसेकराइड्स आणि पॉलीफेनॉल वनस्पतींच्या नमुन्यांसह)

③ प्लास्मिड काढणे

प्लाझमिड हा पेशींमधील एक प्रकारचा गोलाकार लहान रेणू डीएनए आहे, जो डीएनए पुनर्संयोजनासाठी एक सामान्य वाहक आहे.प्लाझमिड काढण्याची पद्धत म्हणजे आरएनए काढून टाकणे, बॅक्टेरियाच्या जीनोमिक डीएनएपासून प्लाझमिड वेगळे करणे आणि तुलनेने शुद्ध प्लाझमिड मिळविण्यासाठी प्रथिने आणि इतर अशुद्धता काढून टाकणे.

fiytjt (11)

सामान्य प्लास्मिड मिनी किट--परिवर्तन आणि एन्झाइम पचन यांसारख्या नियमित आण्विक जीवशास्त्र प्रयोगांसाठी बदललेल्या जीवाणूंपासून उच्च-गुणवत्तेचे प्लाझ्मिड डीएनए द्रुतपणे शुद्ध करा

④ इतर उतारा प्रकार, miRNA काढणे इ.

fiytjt (12)

प्राणी miRNA अलगाव किट--वेगवेगळ्या प्राण्यांच्या ऊती आणि पेशींमधून 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA चे लहान RNA तुकडे जलद आणि कार्यक्षमतेने काढा.

 न्यूक्लिक ॲसिड निष्कर्षण आणि शुद्धीकरण परिणामासाठी आवश्यकताs

① न्यूक्लिक ॲसिडच्या प्राथमिक संरचनेची अखंडता सुनिश्चित करण्यासाठी.

② प्रथिने, शर्करा, लिपिड आणि इतर मॅक्रोमोलेक्यूल्सचा हस्तक्षेप कमी करा

③ न्यूक्लिक ॲसिडच्या नमुन्यांमध्ये एंझाइम रोखू शकणारे कोणतेही सेंद्रिय सॉल्व्हेंट किंवा धातूच्या आयनांचे उच्च प्रमाण नसावे.

④ DNA काढताना RNA आणि इतर न्यूक्लिक ॲसिड दूषित होणे आवश्यक आहे आणि त्याउलट.

 


पोस्ट वेळ: नोव्हेंबर-24-2022
nav_icon